我回来了。诚然,我回来的时间比我计划的要晚一点,我希望在星期一恢复我一贯的尊重——而不是那么尊重——的傲慢,但我们只能说我从中断和充电中回来……不是光滑……然后就这样吧。无论如何,我发现自己在恢复对错误信息和虚假信息的通常监控后不久就受到了欢迎,这些推文是关于据称在母乳中发现的基于 mRNA 的 COVID-19 疫苗的 mRNA 的歇斯底里的推文。事实上,在我缺席期间,有许多话题浮出水面,争夺我的注意力,但我认为,这种对据称会污染母乳的 COVID-19 疫苗的恐惧是让我重新回到博客日常工作的最佳方式,因为它让我看到了一项实际的研究,并让我重新审视了我在 PCR 技术方面的专业知识。另外,我注意到反吸毒者只在推特上只发布研究的主要结果表,而没有实际引用该研究并要求我告诉他们这意味着什么,这很烦人。
但首先,让我们看看 antivax 曲柄圈是如何推动这项研究的。
你能举一个鸡肉或沙拉中 mRNA 的例子吗?仅供参考:mRNA = 信使核糖核酸,你不知道 RNA 和 mRNA 的区别是可怕
的,每天都是新事物。而且我可以说,我一生中做出与健康相关的决定从未如此安全.我很高兴,也很欣慰,我没有接种疫苗。而且我认为时间会让我为接种疫苗的女性朋友和家人感到难过。
我不确定可能摄入 1 到 70 亿婴儿每天的 mRNA 分子是微量的吗?
https://t.co/6VLTRqUW9d 11 名女性中有 5 名在母乳中含有微量的 mRNA。45%。想象一下,在世界范围内。https://t。 co/ql2bzR8KCW
我可以继续说下去,因为有成千上万的这样的推文,但我确实想包括一个反疫苗立法者的推文:
现在我们发现拜登的疫苗命令导致婴儿(没有安全剂量已经建立)通过他们母亲的母乳接收 mRNA。滥用权力会变得更邪恶吗? https://t.co/9v6lz2G37Z pic.twitter .com/lmiOvupBPS
我什至不会讨论来自拥有大量读者的 Substacks 的 antivaxxers 的歇斯底里的反应,例如 Jessica Rose、Byram Bridle,当然还有为他的反应命名的 Steve Kirsch 数据表明你永远不应该乳房接种疫苗后喂宝宝。 (不出所料,数据,即使你完全从表面上看待这项研究,也不要说这样的话。)如果你真的想看看这些疯狂的东西,你也可以随时看看 Naomi Wolf 关于这项研究的视频,但是,老实说,我什至无法完成整整 12 分钟。不过,如果您愿意,欢迎您尝试。如果你这样做,我会引用一首古老的 Yardbirds 歌曲,先生,你是一个比我更好的人。
我可以将这项研究的更多抗病毒放大列为 COVID-19 疫苗正在杀死婴儿的灌篮证据,但是,正如我喜欢说的,不如让我们去看录像带(我的意思是实际的研究)。这是一封研究信函,是最短的学习形式,不幸的是,这项特殊的研究不是开放获取的,这意味着我必须使用我的大学访问权限才能阅读它。
我将立即忽略我注意到的关于这项研究的一件事,这也是凯尔谢尔德里克 (Kyle Sheldrick) 在评论中指出的;具体来说,该研究被列为是在 2020 年 2 月至 2020 年 10 月期间进行的,当时是在任何疫苗可供公众使用之前。诚然,有些人在临床试验中接受了疫苗,但辉瑞和 Moderna 的临床试验特别排除了哺乳期个体。显然这是一个错误,这项研究是在 2021 年进行的,这引出了第二个问题。为什么在八个月的时间里招募的受试者如此之少。只招募了 11 名受试者。这并不完全是一个强大的应计项目。同样,如果应计在 2021 年 10 月结束,为什么要花这么长时间才能发布结果?那是近一年前的事了,对母乳样本进行 RT-PCR、分析数据并将其写成研究信函发表并不需要那么长时间。
我也对方法部分被委托给补充在线内容文件感到恼火。我讨厌那个。方法应该在论文中,如果研究信函的格式太短而无法包含在论文期刊上发表的实际论文中,那么研究结果应该作为实际论文发表。最后,我对用于测量辉瑞和 Moderna 疫苗中使用的刺突蛋白 mRNA 和管家基因对照的所有引物的实际序列感到恼火。如果相同的引物序列已经发表,没有理由不包括确切的序列或参考一篇论文。
这篇论文的全部内容是:
根据 Dae-Eun Jeong 等人 22 推定的疫苗 BNT162b2(辉瑞)和 mRNA1273(Moderna)的序列,设计了两套针对每种疫苗 mRNA 的两个区域的引物,并设计了引物和探针由Integrated DNA Technologies (Coralville, IA)合成。 RNAse P 和 beta 肌动蛋白转录物的表达作为内部对照进行分析,以验证整个 RNA 分离、逆转录和 PCR 过程中的样品质量。使用 Lightcycle 480 Probes Master (cat#04707494001, Roche LifeScience, Indianapolis, IN) 在 QuantStudio3 (Applied Biosystems, Foster City, CA) 上进行实时 PCR。使用 Quantstudio Design and Analysis 软件 15.1 版(Applied Biosystems,Foster City,CA)计算循环阈值 (Ct)。 BNT162b2 (Pfizer) 和 mRNA-1273 (Moderna) 在我院临床使用后立即使用的剩余疫苗(被指定丢弃)用于验证实时 PCR 检测。为进行检测验证,在 2019 年 6 月之前从个体采集的全脂牛奶中添加了 100,000 至 0.1 pg/mL 范围内的已知量疫苗
。当然,使用收集和储存的母乳构建标准曲线是合理的正如作者所做的那样,在大流行之前用已知数量的疫苗加标以覆盖从 1 到 100,000 pg/mL 的浓度范围,但是,同样,作为一个长期的 PCR 专家,他在大流行之前很久就写过关于反病毒者在 PCR 中的不幸事件关于对导致 COVID-19 的冠状病毒 SARS-CoV-2 过于敏感的 PCR 检测如何产生“病例”的说法(尽管他们在过去几年中也没有做过很多 PCR但在此之前的几十年里已经进行了数千次检测),我想知道这个序列。诚然,作者列出了参考文献(#22),但论文中只列出了六个参考文献;所以我仍然对引用的参考文献是否列出了序列感到困惑。事实上,我不是唯一一个因缺乏明确的引物序列列表而烦恼的人。在评论中,Kevin McKernan 指出,“了解引物序列以排除脱靶效应会很有帮助”,并且“由于密码子优化,疫苗具有不同的 GC 含量和序列,但与 C19 的一些同源性可能仍然存在。 ”第一条评论指的是对进行 PCR 的 mRNA 序列非特异性的影响,第二条评论指的是刺突蛋白基因序列的变化,这些变化不会改变辉瑞和 Moderna 生产的用于降低免疫原性并增加mRNAs 的稳定性。
然而,让我们假设引物设计良好,研究人员进行了所有正确的控制以排除脱靶效应,并将 PCR 产物在凝胶上运行以确保产生预期大小的产物并且没有引物二聚体(例如)。作者做了什么,他们的研究发现了什么?
以下是研究人群:
这项队列研究于 2020 年 2 月至 2020 年 10 月进行,包括 11 名健康的哺乳期母亲,她们在分娩后六个月内接种了 BNT162b2(辉瑞)或 mRNA-1273(现代)COVID 疫苗。人口统计数据是通过面对面访谈收集的(表 1)。获得了纽约大学机构审查委员会的批准,所有研究志愿者均签署了书面知情同意书。
这是表 1,其中包含人口统计数据:
至于母乳,它是这样处理的:
通过连续超速离心法从 3 ml BM 中分离出细胞外囊泡 (EV)。通过在 4°C 下以 2,000 和 17,000 xg 连续离心 10 分钟去除细胞和大块碎片后,收集上清液并在 TLA 110 转子中在 4°C 下进行 100,000 g 离心 18 小时。 EVs 颗粒悬浮在 PBS 中,EVs 浓度由 ZetaView 通过 Particle Metrix ZetaView Nanoparticle Tracking Analysis((Particle Metrix,德国)。
为了翻译,母乳经过离心以去除“大块碎片”(颗粒物,等),然后收获上清液(未在管底部结束的层)并在冰箱温度下进行更快的离心 18 小时,这导致从母乳中的细胞外囊泡在管底部,然后将其悬浮在磷酸盐缓冲盐水中。然后对全母乳和 EV 颗粒进行 PCR,得到以下结果:
这些结果总结如下:
在 11 名哺乳期个体中,微量BNT162b2 和 mRNA-1273 COVID-19 mRNA 疫苗在来自 5 名不同参与者的 7 个样本中检测到,在不同时间长达 45 小时(表 2)。平均 (SD) 产量从 EBM 中分离出的 EV 的 d 为 9.110(5.010) 个粒子/mL,平均 (SD) 粒径为 110.0 (3.0) nm。与全脂牛奶相比,EV 中的疫苗 mRNA 浓度更高(表 2)。收集超过 48 小时后,在接种前或接种后 EBM 样本中未检测到疫苗 mRNA。此外,在 EBM 脂肪部分或 EBM 细胞颗粒中未检测到 COVID-19 疫苗 mRNA。
有趣的是,没有一个反疫苗者吹捧这项研究的结果证明疫苗 mRNA 正在进入母亲的母乳并对我们无辜的婴儿造成可怕的伤害,并没有提到在母乳中没有检测到疫苗 mRNA。接种后 48 小时,这应该告诉您,即使您对这些结果感到害怕,接种后 48 小时后也无需担心。有趣的是,在那些散布关于这项研究的恐惧中,这条信息似乎已经消失了。同样,研究中没有任何地方表明检测到的 mRNA 实际上是完整的和功能性的。鉴于以这种方式使用 PCR,检测到的很容易是部分分解的尖峰 mRNA 片段。通常只扩增相对较短(<200个碱基对)的片段,因为扩增的片段越长,扩增效率越差。
作者自己指出:
在 EBM 中检测到的零星存在和微量的 COVID-19 疫苗 mRNA 表明,接种 COVID-19 mRNA 后的母乳喂养是安全的,尤其是在接种后 48 小时后。据我们所知,这些数据首次证明了 COVID-19 疫苗 mRNA 在乳腺细胞中的生物分布,以及组织 EV 包装疫苗 mRNA 以运输到远处细胞的潜在能力。 COVID-19 mRNA 疫苗接种后脂质纳米颗粒在人体组织中的生物分布和定位的报道很少。在大鼠中,肌肉注射后长达 3 天,在心脏、肺、睾丸和脑组织中检测到低疫苗 mRNA 水平,表明组织生物分布。4 我们推测,在疫苗注射后,含有疫苗 mRNA 的脂质纳米颗粒被携带通过血行和/或淋巴途径到达乳腺。5,6 此外,我们推测释放到乳腺细胞胞质溶胶中的疫苗 mRNA 可以被募集到发育中的 EVs 中,这些 EVs 后来在 EBM 中分泌。
我之前已经深入讨论过生物分布研究。如果您想了解详细信息,这里有,但需要注意的一个关键问题是,生物分布研究使用的脂质纳米颗粒剂量比疫苗中典型的成人剂量高约 18-35 倍——因为生物分布研究往往在为了绘制出即使是最少量的药物或疫苗进入体内的位置。
不过,我觉得很奇怪,作者没有提到之前的一项研究,该研究未能在人类母乳中发现疫苗 mRNA,例如近一年前发表在 JAMA Pediatrics 上的一项研究,该研究在乳房中没有发现疫苗特异性 mRNA接种前不到 48 小时的人的牛奶。同样,他们并不是第一个在母乳中发现疫苗 mRNA 的人。这项从 2021 年开始的研究在一小部分受试者的母乳中发现了疫苗 mRNA:在
来自 31 位接受测试的母亲的 309 个样本中,来自 4 位母亲的 5 个母乳样本中检测到了疫苗 mRNA(补充表 2)。所有阳性样本均在接种疫苗后的 3 天内收集 - 第 1 剂第 1 天和第 3 天的两个样本(图 6B)和第 2 剂后第 1 天和第 3 天的另外三个样本。一位母亲在母乳和血清中都可检测到疫苗 mRNA样品。两种样本类型中疫苗 mRNA 的中位数相当:血清中为 14ng/100ml (IQR 8-23),而母乳中为 7ng/100ml (IQR 6-7) (p=0.2)。
来自被测试的五名婴儿的血清样本中没有一个具有可检测到的疫苗 mRNA。在这五名婴儿中,一名婴儿来自母乳和血清中都可检测到疫苗 mRNA 的母亲,另外三名婴儿来自血清中含有疫苗 mRNA 的母亲。
换句话说,当前研究的结果并不新颖,他们甚至没有做任何解决这个问题的最大研究,这让我想知道这项研究如何值得在如此高影响因子的期刊上发表。当然,如果只是记录结果,因为检测到的 mRNA 浓度与之前的研究一致,但在 JAMA Pediatrics 中,即使作为研究信函,也值得发表?我怀疑编辑知道这项研究将是很好的点击诱饵,特别是考虑到他们如何引用它:
这似乎是一个非常不负责任的推文和你应该考虑删除它,因为它被用于错误信息
我还要提到母乳中检测到的 mRNA 数量非常少。我正要进行计算,这时我看到一位免疫学家已经为我做了这些计算,并把它们放在了我现在希望我想到的形式中:
对于 100 毫克剂量的 Moderna,大约 50 个浴缸。对于 30 毫克剂量的辉瑞,只有 15 个。或者对于儿科剂量(10 毫克),只有 5 个浴缸。你可以抽那个,对吧? 7/ https://t.co/doKF5VogQQ
为了解决以某种方式进入母乳的邪恶脂质纳米颗粒一定会毒害我们的婴儿的担忧,有这样的:
感谢您提醒我这项针对 50 人的研究,该研究提出了这个问题并且无法检测到母乳中的 PEG。 9/https://t.co/QK4CfmoTsz
当然,真正发挥作用的地方在于母乳中 COVID-19 mRNA 的发现是否具有临床相关性;即,它是否会造成任何可检测到的伤害。我在搜索其他测量人类母乳中 mRNA 水平的研究时发现了多篇论文,这些研究正是针对这个问题,例如来自新加坡的这项研究,研究了 88 对母子,但没有发现任何问题的证据。但是,可以在此处找到更全面的评论之一,其中指出:
接受 mRNA 疫苗的女性的牛奶样本中只有一小部分含有微量的 mRNA。一项研究中的 40 个牛奶样品中的 36 个和另一项研究中的 309 个牛奶样品中的 5 个具有可检测的 mRNA 水平;在一项研究中发现的最高浓度为 2 mcg/L,而在另一项研究中发现的中位浓度为 70 ng/L;在任何母乳喂养婴儿的血清中均未检测到 mRNA。[18–20] mRNA 的血清半衰期估计为 8 至 10 小时。[18,19] Pfizer-BioNTech 疫苗中的微量聚乙二醇-2000未在母乳中发现或口服吸收,因此母乳中的 PEG 暴露于母体免疫接种中不是问题。[21] 美国可用的 mRNA 疫苗均不含防腐剂或佐剂。
此外,Ed Nirenberg 还带领我进行了一项大型研究:
在一项包含 10,278 名在接种疫苗后没有中断母乳喂养的哺乳期个体的队列研究中,10,278 名中的 121 名(1.2%)报告了他们在接种疫苗后母乳喂养的婴儿有任何问题。 https://t.co/noGGlsY7aK
基本上,我们有大量证据表明,在人类母乳中发现疫苗衍生的 mRNA 是不常见的、短暂的,并且没有任何危害的证据,并且有证据表明疫苗的其他成分都没有。疫苗会造成伤害。鉴于我们一直从食物中摄取 RNA 和 DNA,这一结果当然不足为奇。每个植物和动物的每个细胞都含有 RNA 和 DNA。此外,众所周知,RNA 是不稳定的,即使是疫苗中使用的修饰 RNA,其稳定性也不如未修饰的 RNA,不是特别稳定。 DNA 更稳定,但即使是 DNA 在消化道条件下也存在耐受性问题。来自胃的酸会攻击核酸,并且有许多消化酶,如胃蛋白酶和核酸酶,会很快分解 RNA。正如 Ed Nirenberg 还指出的那样,也有例外,例如主要感染消化道的病毒(例如脊髓灰质炎病毒)的疫苗,因此对那里的恶劣条件具有抵抗力,但 COVID-19 mRNA 疫苗不是这些例外。
最后,人们不禁对 antivaxxers 的不一致感到好笑。有没有人记得当他们谴责基于 PCR 的 COVID-19 测试时,因为它们涉及到 40 个周期,antivaxxers 声称,这会产生很多、很多误报,因为很多周期使测试过于敏感?这就是“流行病”阴谋论的由来,它错误地声称确实没有大流行,只是诊断出的 COVID-19 病例的“流行病”,因为有太多误报,所以毫无意义。我不禁要指出,抗病毒者讨厌非常敏感的 PCR 检测,并将他们归咎于“假流行病”;也就是说,直到非常敏感的 PCR 检测在接种疫苗的母亲的母乳中发现微小的、临床上不相关的疫苗 mRNA(可能是它的片段),并且在接种疫苗后最多持续三天。然后他们认为 PCR 很好,因为它让他们散布谎言,说给哺乳期的人接种疫苗会中毒,或者给婴儿接种致命的刺突蛋白。
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